枇杷葉是一種傳統(tǒng)中藥,含有多種活性成分。為了研究枇杷葉化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)及藥理活性,本技術(shù)對(duì)枇杷葉進(jìn)行提取分離,鑒定所得成分的結(jié)構(gòu),并且檢測(cè)部分化學(xué)成分的抗腫瘤活性。分離鑒定:枇杷干燥葉經(jīng)過(guò)90%乙醇回流提取后,濃縮提取液,逐次萃取濃縮液,分別進(jìn)行分離純化,結(jié)果從枇杷葉乙醇提取物中分離到15個(gè)化合物。依據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定所得化合物為:烏蘇酸(1)、薔薇酸(2)、2α,3α,19α-三羥基-12-烯-28-齊墩果酸(3)、齊墩果酸(4)、2α,19α-二羥基-3-羰基-12-烯-28-烏蘇酸(5)、2α,3β,13β-三羥基-11-烯-28-烏蘇酸(6)、2α-羥基白樺脂酸甲酯(7)、科羅索酸甲酯(8)、烏蘇醇(9)、科羅索酸(10)、β-谷甾醇(11)、2α,3α,19α,23-四羥基齊墩果酸(12)、正二十一烷醇(13)、2α,3β,19α,23-四羥基-12-雙鍵-28-O-β-D葡萄糖烏蘇苷(14)、槲皮素(15)。化合物6、7、9、12、13和14首次從枇杷屬植物中分離得到。抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn):本技術(shù)利用MTT法、CCK-8試劑盒檢測(cè)法來(lái)檢測(cè)枇杷提取物對(duì)癌細(xì)胞的抑制率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)化合物1、10和混合物在體外對(duì)PC-3細(xì)胞具有很好的抑制率,化合物4和12對(duì)PC-3有一定的抑制作用。化合物1和10在體外都對(duì)B16-F10細(xì)胞有抑制作用。再用酶聯(lián)免疫的二位點(diǎn)一步法來(lái)檢測(cè)三萜對(duì)B16-F10小鼠黑色素瘤分泌INF-γ、TNF-α的影響,研究三萜對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用的機(jī)理,但發(fā)現(xiàn)INF-γ、INF-α的分泌量沒(méi)有增加。
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