本發明公開一種用于毛細管色譜內壁修飾固定相及其制備方法,其采用納米SiO2顆粒作為修飾試劑,采用多層組裝法在毛細管內壁修飾納米SiO2修飾層,修飾好的納米SiO2修飾層的厚度可控、修飾層厚度可在160~600nm間調節,有效地解決了毛細管電色譜的固定相柱容過低的問題。本方法一次修飾可獲得6~7層納米顆粒修飾層,三次修飾即可達到22~23層,修飾效率高,修飾時間短,毛細管內徑選擇范圍廣,是一種制備毛細管開柱的理想方法。