固定化重組頭孢菌素脫乙酰酶生產

生物、醫藥及醫療機械

本項目利用重組大腸桿菌異源表達來自枯草芽孢桿菌中的CAH基因，發酵生產頭孢菌素

脫乙酰酶蛋白。由于重組蛋白表達量高，采用簡單的硫酸銨分級沉淀方法即可達到很好的純化

效果，極大程度地縮減了蛋白純化的成本。

在工業應用中，將游離酶固定在載體上可以實現多次重復利用，產物分離容易，可以連

續操作。在眾多固定化酶方法中，由于制備的固定化酶穩定性好，共價結合的方法在工業中最

為常用。本項目采用共價結合的固定化方法，在溫和條件下將游離酶連接在親水性環氧基載體

上，得到的固定化酶活力回收高，穩定性好，重復使用次數高。已完成整條工藝流程。重組大腸桿菌發酵生產CAH蛋白進入中試階段，通過優化培養條

件，發酵培養基等工作，降低生產成本，提高產酶量。目前完成的蛋白純化及固定化酶制備工

藝，對產品的性能已通過相關的實驗得到很好的評價結果。在不斷完善發酵和固定化酶制備工

藝后，即可以進一步擴大生產試驗規模，從而應用于工業生產。

試用