RNA修飾m6A單基因單堿基檢測新技術

化學化工

（ i ）能夠阻礙 DNA 聚合酶在反轉錄過程的單堿基延伸；

（ ii ）能夠降低缺口連接酶的連接效率。 SELECT 方法采用熒光定量 PCR 的方法進行定量。結合方法優化，發展了 SELECT 方法的 3 個應用實例：

（ i ）在生物學樣本總 RNA 或總 mRNA 中檢測 mRNA 或 lncRNA 上單位點是否含有 m⁶A 修飾；

（ ii ）檢測生物學樣本中特定 m⁶A 位點的修飾比例；

（ iii ）鑒定 m⁶A 甲基轉移酶或去甲基酶的生理作用靶點。 SELECT 方法不僅簡化了生物學樣品中 m⁶A 修飾的檢測過程，實現低豐度 RNA 中 m⁶A 單堿基分辨率的檢測，還能夠應用于其他 RNA 化學修飾的檢測中，例如 N¹- 甲基腺嘌呤（ N¹-methyladenosine ， m¹A ）和 2’-O- 甲基化修飾（ 2’-O-methylation ， N_m) 等。

未應用